Preparation of stained specimens (see below)

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pathological test
histopathological test
Preparation of stained specimens (see below)

Laboratory：Akiruno

○Preparation of stained specimens (see below)

CODE：05653 1

TEST NAME SPECIMEN SUBMISSION SPECIMEN
REQUIREMENT
CONTAINER CAP COLOR STORE
TEMPERATURE
(STABILITY) TURNAROUND
TIME (DAY) METHODOLOGY
Preparation of stained specimens (see below)
Unstained specimen slide 2 pieces Z10
＊5-7

COMMENT

*Required number of days
・If degreasing and deashing are required, the required number of days will be 7 to 12 days.
　・If enzyme antibody staining is required, it will take approximately 2 weeks.
・If fluorescent antibodies are required, the required time will be 2 to 3 weeks.
　・If a bone marrow image is required, it will take approximately 2 weeks.
　・Organs that require diagnosis by a specialist (skin, liver, bone marrow, heart, etc.) require 7 to 12 days.
　・Surgical materials (when cutting out 5 blocks or more) will take 2 to 3 weeks.
　・ In the case of special requests, if there are a large number of requests (approximately 20 or more depending on the processing content), the required number of days will be longer than usual, so please contact our sales staff in advance.
Please prepare a smear specimen, place it in the object case below, and submit it by storing it at room temperature.

CONTAINER

Z10 旧容器記号 t 30

[オブジェクトケース]
プレパラート (スライドグラス)

貯蔵方法：室温

supplementary information

各種染色一覧

	染色法	目的			結果	備考
	ヘマトキシリン・エオジン (HE) 染色	一般染色			細胞核、軟骨、細菌、未脱灰石灰化部-青藍色 (ヘマトキシリン) 細胞質、結合組織、筋組織、赤血球-種々の紅～赤紅色 (エオジン)	すべての染色の基本染色
	エラスチカ・ワンギーソン染色	結合組織の染色	膠原線維		膠原線維-鮮紅色 (酸フクシン)、筋線維、赤血球、細胞質-黄色 (ピクリン酸)、核-黒褐色 (ワイゲルト鉄ヘマトキシリン)、弾性線維-黒紫色	ワンギーソン染色の単染色で利用されることもあります
	アザン染色				膠原線維、細網線維、腎糸球体および尿細管基底膜、粘液、軟骨-青色 (アニリン青) 核、細胞質、筋組織、線維素-赤～紅色 (アゾカルミンG)、赤血球-赤～赤橙色 (アゾカルミンG、オレンジG)	酸フクシンで染める方法があります
※	マッソン・トリクローム染色				核-黒褐色 (ワイゲルト鉄ヘマトキシリン) 使用する染色液により結果が異なる	各種の変法があります
※	レゾルシン・フクシン染色		弾性線維		弾性線維-黒紫色	代表的な染色法、ワンギーソン染色と重染色することがあります
※	オルセイン染色		弾性線維		弾性線維、HBs抗原-茶褐色	HBs抗原染色として利用されることもあります
	銀染色 (鍍銀法)		細網線維		好銀線維 (細網線維) -黒色膠原線維-赤紫色
※	リンタングステン酸ヘマトキシリン (PTAH) 染色	線維素、神経膠組織			横紋筋内横紋、線維素、核-青藍色神経膠細胞、神経膠線維-茶褐色	横紋筋の横紋が染まります
	PAS反応	多糖類染色	糖原 (グリコーゲン)		グリコーゲン-赤～赤紫色、核-青藍色 (ヘマトキシリン)	粘液、肥満細胞顆粒、アメーバ、真菌も染まります PAS反応は各種の染色目的に利用されますグリコーゲンは唾液、ジアスターゼ消化法で確認、アルコール固定も可
	アルシアン青染色		酸性粘液多糖類		酸性粘液多糖類-青色、核-赤色 (ケルンエヒトロート)	PAS染色との重染色法があります
※	ムチカルミン染色		粘液		粘液-赤色、核-青藍色 (ヘマトキシリン)	上皮性粘液がよく染まります
※	トルイジン青染色		粘液		粘液・肥胖細胞の顆粒・軟骨基質-赤紫色、核-青
※	コンゴ赤染色	アミロイド染色			アミロイド-赤橙色、核-青藍色 (ヘマトキシリン)	過マンガン酸処理によるアミロイドの鑑別があります
	ダイロン (ダイレクトファーストスカーレット) 染色	アミロイド染色			アミロイド-橙色、核-青藍色 (ヘマトキシリン)	過マンガン酸処理によるアミロイドの鑑別があります
※	グリメリウス法 (好銀性染色)	内分泌細胞の鑑別染色			消化管好銀細胞、下垂体好銀細胞、カルチノイド、膵ラ島A細胞、内分泌腫瘍細胞-黒褐色	ブアン固定も可
※	フォンタナ・マッソン法	内分泌細胞の鑑別染色			消化管銀還元細胞、銀還元性カルチノイド、メラニン細胞-黒褐色	メラニン細胞の証明にも用います
※	コッサ法	組織内無機物の染色	カルシウム		カルシウム沈着部-黒褐色	貴金属を含む固定液は避けてください
	ベルリン青染色		鉄		ヘモジデリン-青色、背景-淡紅色 (ケルンエヒトロート)	染色対象はほとんどヘモジデリンです
※	ルベアン酸法		銅染色		銅-黒緑色
※	レフレルのメチレン青単染色	組織内病原体の染色	一般細菌	単染色	細菌-濃青色、核、背景-淡青色
※	フッカー・コンのグラム染色		一般細菌	グラム染色	グラム陽性菌-濃青色グラム陰性菌-赤色
	チール・ネルゼンの抗酸菌染色		抗酸菌染色		抗酸菌-赤色、背景-淡い青色 (メチレン青)
※	グロコット染色		真菌		真菌-黒色、背景-緑色 (ライト緑)	グリコーゲン、粘液も黒染します
	オルセイン染色		HBs抗原		HBs抗原、弾性線維-茶褐色	HBs抗原は細胞質内封入体または細胞内にび慢性に染め出されます
※	ビクトリア青染色		HBs抗原		HBs抗原、弾性線維-青色	弾性線維染色にも用いられます
※	ルクソール・ファスト青染色 (クリューバ・バレラ染色)	中枢神経組織の染色	髄鞘、ニッスル小体重染色		髄鞘-青緑色ニッスル顆粒、核-紫色
※	ニッスル小体・単染色	中枢神経組織の染色	髄鞘、ニッスル小体重染色		ニッスル顆粒-紫色
※	過ヨウ素酸メセナミン銀 (PAM) 染色	腎の染色			腎糸球体基底膜、細網線維-黒色	腎以外多目的に利用されますブアン固定も可
	ギムザ染色	組織内血液細胞の染色			核-赤紫色、核小体-赤色、好酸顆粒-桃紫色好塩基性顆粒-青紫色～青色	ヘリコバクターピロリ菌も染まりますピロリ菌-青紫色
※	ナフトールAS-Dクロロアセテートエステラーゼ染色	白血病細胞の鑑別、単球の鑑別、FAB分類			骨髄球系-赤色顆粒

当社では、10 ～ 20％ホルマリン固定液を基本として各種染色を行っております。

染色法

目的

結果

備考

ヘマトキシリン・エオジン (HE) 染色

一般染色

細胞核、軟骨、細菌、未脱灰石灰化部-青藍色 (ヘマトキシリン)
細胞質、結合組織、筋組織、赤血球-種々の紅～赤紅色 (エオジン)

すべての染色の基本染色。

マッソン・トリクローム染色

結合組織の染色

膠原線維

核-黒褐色 (ワイゲルト鉄ヘマトキシリン) 使用する染色液により結果が異なります。

各種の変法があります。

エラスチカ・ワンギーソン染色

膠原線維
弾性線維

膠原線維-鮮紅色 (酸フクシン)、筋線維、赤血球、細胞質-黄色 (ピクリン酸)、核-黒褐色 (ワイゲルト鉄ヘマトキシリン)、弾性線維-黒紫色

ワンギーソン染色の単染色で利用されることもあります。

銀染色 (鍍銀法)

細網線維

好銀線維 (細網線維) -黒色
膠原線維-赤紫色

PAS反応

多糖類染色

糖原 (グリコーゲン)

グリコーゲン-赤～赤紫色、核-青藍色 (ヘマトキシリン)

粘液、肥満細胞顆粒、アメーバ、真菌も染まります。
PAS反応は各種の染色目的に利用されます。
グリコーゲンは唾液、ジアスターゼ消化法で確認。

アルシアン青染色

酸性粘液多糖類

酸性粘液多糖類-青色、核-赤色 (ケルンエヒトロート)

PAS染色との重染色法があります。

ダイレクトファーストスカーレット染色

アミロイド染色

アミロイド-赤橙色、核-青藍色 (ヘマトキシリン)

過マンガン酸処理によるアミロイドの鑑別があります。

グリメリウス法
(好銀性染色)

内分泌細胞の鑑別染色

消化管好銀細胞、下垂体好銀細胞、カルチノイド、膵ラ島A細胞、内分泌腫瘍細胞-黒褐色

フォンタナ・マッソン法

消化管銀還元細胞、銀還元性カルチノイド、メラニン細胞-黒褐色

メラニン細胞の証明にも用います。

ベルリン青染色

組織内無機物の染色

鉄

ヘモジデリン-青色、背景-淡紅色 (ケルンエヒトロート)

染色対象はほとんどヘモジデリンです。

チール・ネルゼンの抗酸菌染色

組織内病原体の染色

抗酸菌染色

抗酸菌-赤色、背景-淡い青色 (メチレン青)

グロコット染色

真菌

真菌-黒色、背景-緑色 (ライト緑)

グリコーゲン、粘液も黒染します。

ギムザ染色

組織内血液細胞

細菌-赤紫色、核-赤紫色、好酸顆粒-桃赤色

色素のもつ酸性あるいは塩基性性質を利用して、細胞を染色します。ヘリコバクターピロリ感染の補助的検査として用いられます。

リンタングステン酸
ヘマトキシリン染色
(PTAH)

神経膠繊維

神経膠繊維
フィブリン

神経膠繊維、核-青色、フィブリン-青色
軸索、神経細胞-鮮紅色
結合組織-褐色

トルイジン青染色

多糖類染色

酸性粘液多糖類

酸性粘液多糖類-メタクロマジー (赤紫色)

	pH2.5	4.1	7.0
ヒアルロン酸	(-)	(+)	(+)
コンドロイチン硫酸	(+)	(+)	(+)

ムチカルミン染色

中性粘液
多糖類
糖蛋白
粘液蛋白

粘液-赤色

上皮性粘液がよく染まります。

グラム染色 (フッカー・コン法)

組織内病原体の染色

一般細菌

陽性菌-青～黒色
陰性菌、繊維素-赤色

コッサ法

組織内無機物質染色

カルシウム

石灰沈着部-黒褐色

List of various staining techniques

STAINING METHOD	PURPOSE			RESULT	COMMENT
Hematoxylin-eosin (HE) staining	General staining			Cell nuclei, cartilage, bacteria, undecalcified and calcified parts: Indigo blue (hematoxylin). Cytoplasm, connective tissues, muscular tissues, red blood cells: Various colors of deep red to red (eosin)	Basic staining for all staining techniques
Elastica van Gieson staining	Staining of connective tissues	Collagen fiber		Collagen fiber: Red (acid fuchsin). Muscular fiber, red blood cells, cytoplasm: Yellow (picric acid). Nuclei: Blackish brown (Weigert’s iron hematoxylin). Elastic fiber: Purple-black.	The van Gieson staining alone is also used.
Azan staining				Collagen fiber, reticular fibers, renal glomeruli, renal tubular basement membrane, mucus, cartilage: Blue (aniline blue). Nuclei, cytoplasm, muscular tissues, fibrin: Red to deep red (azocarmine G). Red blood cells: Red to red-orange (azocarmine G, orange G)	Acid fuchsin staining can also be used.
Masson’s trichrome staining				Nuclei: Blackish brown (Weigert’s iron hematoxylin). Depending on stains used, different results are obtained.	Various modified methods are available.
Resorcin-fuchsin staining		Elastic fiber		Elastic fiber: Purple-black	This is a representative technique of staining and also used for double staining with van Gieson staining.
Orcein staining		Elastic fiber		Elastic fiber, HBs antigen: Dark reddish-brown	This is also used as HBs antigen staining.
Silver staining (silver impregnation)		Reticular fibers		Argyrophilic fibers (reticular fibers): Black Collagen fiber: Red-purple
Phosphotungstic acidhematoxylin (PTAH) staining	Fibrin, glia tissues			Stripes in the striated muscles, fibrin, nuclei: Indigo blue Neuroglia cells, neuroglia fiber: Dark reddish-brown	Stripes in the striated muscles are stained.
Periodic acid-Schiff (PAS) reaction	Polysaccharide staining	Glycogen		Glycogen: Red to red-purple. Nuclei: Indigo blue (hematoxylin)	Mucus, mast cell granules, amebas, and fungi are also stained. PAS reaction is used for various kinds of staining. Glycogen is confirmed by diastase digestion test using saliva, and it can also be fixed with alcohol.
Alcian blue staining		Acid mucopolysaccharide		Acid mucopolysaccharide: Blue. Nuclei: Red (Kernechtrot)	This is also used for double staining with PAS.
Mucicarmine staining		Mucus		Mucus: Red. Nuclei: Indigo blue (hematoxylin)	Epithelial mucus is well stained.
Toluidine blue staining		Mucus		Mucus, mast cell granules, cartilage matrix: Red-purple. Nuclei: Blue
Congo red staining	Amyloid staining			Amyloid: Red-orange. Nuclei: Indigo blue (hematoxylin)	Permanganic acid treatment can differentiate amyloid.
Dylon (direct fast scarlet) staining	Amyloid staining			Amyloid: Orange. Nuclei: Indigo blue (hematoxylin)	Permanganic acid treatment can differentiate amyloid.
Grimelius (argyrophil) staining	Differential staining of endocrine cells			Argyrophilic cells in the digestive tract, argyrophilic cells in the pituitary gland, carcinoid, A-cells in the islets of Langerhans in the pancreas, endocrine tumor cells: Blackish brown	Bouin fixation is also available.
Fontana-Masson staining	Differential staining of endocrine cells			Argentaffin cells in the digestive tract, argentaffin carcinoid, melanocyte: Blackish brown	This is also used to confirm evidence of melanocytes.
Kossa staining	Staining of inorganic substances in tissues	Calcium		Calcium deposits: Blackish brown	Avoid using a noble metal-containing fixative solution.
Berlin blue staining		Iron		Hemosiderin: Blue. Background: Pink (Kernechtrot)	Hemosiderin accounts for most part of the substances to be stained.
Rubeanic acid staining		Copper staining		Copper: Black-green
Loeffler’s methylene blue staining	Staining of pathogenic microorganisms in tissues	Common bacteria	Simple staining	Bacteria: Deep blue. Nuclei, background: Light blue
Hucker-Conn gram staining		Common bacteria	Gram staining	Gram-positive bacteria: Deep blue Gram-negative bacteria: Red
Ziehl-Neelsen method of acidfast bacteria staining		Acid-fast bacteria staining		Acid-fast bacteria: Red. Background: Light blue (methylene blue)
Grocott staining		Fungi		Fungi: Black. Background: Green (light green)	Glycogen and mucus are also stained black.
Orcein staining		HBs antigen		HBs antigen, elastic fiber: Dark reddish-brown	HBs antigen is diffusely stained in intracytoplasmic inclusion bodies or cells.
Victoria blue staining		HBs antigen		HBs antigen, elastic fiber: Blue	This is also used for elastic fiber staining.
Luxol fast blue staining (Klüver-Barrera staining)	Staining of the central nervous tissue	Double staining of medullary sheath and Nissl body		Medullary sheath: Blue-green Nissl body, nuclei: Purple
Simple staining of Nissl body	Staining of the central nervous tissue	Double staining of medullary sheath and Nissl body		Nissl body: Purple
Periodic acid-methenamine silver (PAM) staining	Staining of the kidney			Renal glomerular basement membrane, reticular fibers: Black	This is also used for many purposes as well as for the kidney. Bouin fixation is also available.
Giemsa staining	Staining of blood cells in tissues			Nuclei: red-purple. Nucleoli: Red. Eosinophilic granules: Pink purple Basophilic granules: Blue-purple to blue	Helicobacter pylori is also stained. Helicobacter pylori: Blue-purple
Naphthol AS-D chloroacetate esterase staining	Leukemic cell differentiation, monocyte differentiation, FAB classification			Myelocytes: Blue granules

SRL uses 20% formalin fixative for most of the staining.

病理学的検査注記
検査材料の提出方法
依頼書およびラベルへの記入方法
検査結果の報告
参考文献
依頼書の記入要項
組織検体採取上の注意
Points to note concerning histopathological test
Submitting testing materials
Filling in the request form and labels
Reporting test results

TEST DIRECTORY